Главная
|
Цитотоксические лимфоциты. РасчетРасчет индекса цитотоксичности возможен для самых различных модификаций экспериментов. Измеряют радиоактивность надосадочной фракции и осадка. ZIM — радиоактивность надосадочной.
фракции клеток-мишеней, инкубированных с сенсибилизированными лимфоцитами; А: значение цитотоксичности (ZT) можно отнести к общей радиоактивности и выразить в виде % увеличения (надосадочная фракция) или уменьшения (осадок). (уравнение 1) (уравнение 2) Оба значения идентичны. Б: если исходить из цитотоксического индекса (ZI) (уравнение 3) то в соответствии с преобразованием
% снижения или увеличения радиоактивности выражается в форме (уравнение 4) (уравнение 5) Уравнения 4 и 5 дают одинаковые результаты. Уравнение 4 пригодно для визуальной оценки микроцитотоксического теста, когда вместо числа распадов учитывают число клеток. В: если учесть, что не вся радиоактивность клеток-мишеней высвобождается под воздействием эффекторных клеток, а только некоторая величина ZMAX (связанной с клетками остается ZMIN), то (Уравнение 6) (уравнение 7) Уравнения б и 7 также дают одинаковые результаты. Данные, получаемые при использовании различных формул, отличаются друг от друга. Различие зависит в первую очередь от величины ZKO (ZKO) и ZMAX (ZMIN). При ZGES >> ZKO уравнение 5 переходит в уравнение 1, при ZGES = ~ ZMAX уравнение 6 переходит в уравнение 5. При высоких значениях Zmax и низких значениях радиоактивности уравнения 1,5 и 6 дают близкие результаты; высокий % спонтанного высвобождения метки с контрольными лимфоцитами приводит к сходным данным, получаемым по формулам 5 и 6. Эти данные больше тех, которые рассчитываются по уравнению 1. Часто для подсчета ZT используют не значение радиоактивности, получаемое под воздействием контрольных клеток, а значение, получаемое при спонтанном процессе (ZSR). Проблемы возникают в случае постановки обоих контролей и если ZKO > ZSR. Это имеет место при культивировании in vitro, когда ZT контрольных клеток доходит до 15%. В каждом случае приходится приводить сведения относительно методов расчета, использованных в цитотоксической реакции. |
|